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構(gòu)巢曲霉PCR檢測試劑盒說明書

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更新日期:
2024-08-29
點擊次數(shù):
2833
產(chǎn)品特點:
構(gòu)巢曲霉PCR檢測試劑盒說明書實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
  50T構(gòu)巢曲霉PCR檢測試劑盒說明書的詳細資料:

服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱

 構(gòu)巢曲霉PCR檢測試劑盒說明書

 英文名稱

 Aspergillus nidulansPCR

 貨號

 HE30625-R

實驗外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構(gòu)建

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特點優(yōu)勢:
    1.   特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
    2.   重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
    3.   靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
    4.   實用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
     5.   優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
    6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線。
抗可提取核抗原抗體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:粘度(1%,25℃) ≥500 mpa.s 包裝;5g

抗可溶性肝抗原抗體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:≥99.0%,BR 包裝;50mg

抗菌肽LL-37 elisa試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 包裝;5MG

抗菌肽試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>500U/mg,BR 包裝;25g

抗菌肽試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,細胞培養(yǎng)級 包裝;5g

抗巨細胞病毒試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;5ml

抗巨細胞病毒試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BP2009,BR 包裝;25g

抗巨噬細胞抗體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標準品 包裝;5g

抗酒石酸酸性磷酸酶5b試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:≥99%,BR 包裝;100ml

抗抗體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品 包裝;25ml

抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 包裝;500ml

抗角蛋白抗體elisa試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:含量≥99.0%(HPLC) 包裝;1g

抗膠原蛋白抗體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99.0%,標準品 包裝;250mg

抗甲狀腺微粒體抗體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC),BR,可用于細胞培養(yǎng) 包裝;100ml

抗甲狀腺球蛋白抗體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP33,BR 包裝;25ml

抗甲狀腺過氧化物酶抗體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品 包裝;5ml

抗甲型肝炎病毒抗體IgM試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR 包裝;100g
構(gòu)巢曲霉PCR檢測試劑盒說明書Bacillusmethylotrophicus 中文名稱:甲基營養(yǎng)型芽胞桿菌種屬:Bacillusmethylotrophicus分離基物:稻根際土壤提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:分類學(xué)研究。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0904;(R2A);酵母粉0.50g,月示蛋白胨0.50g,,酪蛋白解物0.50g,葡萄糖0.50g,可溶性淀粉0.50g,丙酮酸鈉0.30g,KH2PO40.30g,MgSO4×7H2O0.05g,瓊脂15g。蒸餾1000mL。終pH7.2,在加入瓊脂前用結(jié)晶KH2PO4或K2HPO4調(diào)pH,加入瓊脂后加熱溶解,并于121℃濕熱滅菌15min。生長條件:30℃;好氧存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%

Myrotheciumverrucaria 中文名稱:疣孢漆斑菌種屬:Myrotheciumverrucaria分離基物:空氣提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0014;馬鈴薯、葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基:(PDA);馬鈴薯提取液1.0L,葡萄糖20.0g,瓊脂15.0g,pH自然。[注]馬鈴薯提取液生長條件:25℃;好氧存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%

Bacillussubtilis 中文名稱:枯草芽胞桿菌種屬:Bacillussubtilis提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:蒸汽滅菌指示菌,可用于低于121℃蒸汽滅菌生物指示劑制備。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂;蛋白胨5.0g,牛肉浸取物3.0g,NaCl5.0g,瓊脂15.0g,蒸餾1.0L,pH7.0。[注]培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mgMnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。121℃,15分鐘滅菌。生長條件:30℃,好氧存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%

Fusariumgraminearum 中文名稱:禾谷鐮孢種屬:Fusariumgraminearum提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:植物生防拮抗試驗供試病原菌。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0014;馬鈴薯、葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基:(PDA);馬鈴薯提取液1.0L,葡萄糖20.0g,瓊脂15.0g,pH自然。[注]馬鈴薯提取液生長條件:30℃;好氧存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%

Exserohilumturcicum 中文名稱:土耳其凸臍孢菌種屬:Exserohilumturcicum提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:植物生防拮抗試驗供試病原菌。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0014;馬鈴薯、葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基:(PDA);馬鈴薯提取液1.0L,葡萄糖20.0g,瓊脂15.0g,pH自然。[注]馬鈴薯提取液生長條件:30℃;好氧存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;定期移植法 純度:99%

PseudomonasCocovenenansSubsp 中文名稱:酵米面假單胞菌(酵米面黃桿菌)種屬:PseudomonasCocovenenansSubsp安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:37℃ 純度:99%

Auricularia sp. 中文名稱:木耳(斜面)種屬:Auricularia sp.提供形式:試管斜面安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:食用培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷酸二氫鉀 3g,硫酸鎂 1.5g,葡萄糖 20g,維生素B1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。生長條件:25-28℃,好氧 純度:99%

Grifola frondosa(Fr.)S.F.Gray 中文名稱:灰樹花(斜面)種屬:Grifola frondosa(Fr.)S.F.Gray提供形式:斜面安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:食用和藥用培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA:20%馬鈴薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺素微量,瓊脂 15g,pH 自然,121℃,15min。生長條件:26℃,7-10天 純度:≥99%

 

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 構(gòu)巢曲霉 PCR檢測試劑盒 50T
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