產(chǎn)品僅用于科研注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 產(chǎn)品名稱:乙型肝炎病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格 規(guī)格:50T 編號:HE32096-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。 ? 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點: 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 乙基谷硫磷溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1mL Amycolaptosis spp.擬無枝菌酸菌通用PCR試劑盒 乙基溴硫磷溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1mL Amycolaptosis spp.擬無枝菌酸菌通用染料法熒光定量PCR試劑盒 溴硫磷溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1mL Amycolaptosis spp.擬無枝菌酸菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒 溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1mL Amycolata autotrophica自養(yǎng)無枝酸菌PCR試劑盒 硫磷溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1mL Amycolata autotrophica自養(yǎng)無枝酸菌染料法熒光定量PCR試劑盒 液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1mL Amycolata autotrophica自養(yǎng)無枝酸菌探針法熒光定量PCR試劑盒 土壤QC樣-多環(huán)芳烴(PAH) 30克 Anaplasma centrale 中央無漿體(無形體)PCR試劑盒 總余氯標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 20mL Anaplasma centrale 中央無漿體(無形體)染料法熒光定量PCR試劑盒 總余氯標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 20mL Anaplasma centrale 中央無漿體(無形體)探針法熒光定量PCR試劑盒 人血清無機(jī)成分電解質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1.6mL*3 Anaplasma marginale邊緣無漿體(無形體)PCR試劑盒 六氯溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1mL Anaplasma marginale邊緣無漿體(無形體)染料法熒光定量PCR試劑盒 硫丹溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1mL Anaplasma marginale邊緣無漿體(無形體)探針法熒光定量PCR試劑盒 丙線磷法熒光定量PCR試劑盒 固體水分標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 5g Anaplasma phagocytophilum嗜吞噬細(xì)胞無漿體(無形體)探針法熒光定量PCR試劑盒 轉(zhuǎn)移核糖核酸(酵母)/t-RNABR,15~20A260單位/mg100毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,9014-25-92~8℃ 中文名稱: 轉(zhuǎn)移核糖核酸(酵母) 其他名稱: 9014-25-9 英文名稱: t-RNA 其他名稱: t-Ribonucleic acid(yeast);Transfer RNA;Ribonucleic acid transfer from baker's yeast 產(chǎn)品規(guī)格: BR,15~20A260單位/mg 包 裝: 100毫克 CAS號:9014-25-9 級別:BR 含量:15~20A260單位/mg 電泳試驗:合格 性狀:灰色至灰褐色粉末 用途:生化研究。蛋白質(zhì)生物合成中特異地轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸,并保證遺傳信息從核酸到蛋白質(zhì)準(zhǔn)確傳遞的一類小分子核糖核酸。每種氨基酸有一種以上相應(yīng)的tRNA,每個細(xì)胞約有40~70種不同的tRNA,分別由72~93個核苷酸組成,其中5%~20%為稀有堿基,相對分子量平均:為25 000,沉降系數(shù)4S。不同tRNA的一級結(jié)構(gòu)不同,但有共同的三葉草二級結(jié)構(gòu)特征。其中氨基酸臂上3′端-C-C-A-OH是結(jié)合氨基酸的位點,氨基酸的?;谔禺惖陌被RNA合成酶催化下附著于相應(yīng)tRNA3′端腺苷的3′羥基上;反密碼環(huán)中三個連續(xù)的核苷酸構(gòu)成反密碼子與核糖體上mRNA的密碼子互補(bǔ)結(jié)合,使氨基酸準(zhǔn)確對號入座合成多肽鏈。通過這種密碼-反密碼-氨基酸之間的對應(yīng)關(guān)系,保證了核酸到蛋白質(zhì)的信息準(zhǔn)確傳遞。tRNA起了重要的接合(adaptor)作用 保存:2~8℃ 核糖核酸鈉鹽(酵母)/核酸鈉鹽/RNA鈉/RNA-NaBR,90%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,CAS:9010-05-32~8℃ 25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌, 100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌, 中文名稱: 核糖核酸鈉鹽(酵母) 1公斤,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌, 其他中文名稱: 核酸鈉鹽;RNA鈉 英文名稱: RNA-Na 其他英文名稱: Ribonucleic acid sodium salt(yeast) ;Sodium nucleina 產(chǎn)品規(guī)格: BR,90% 包 裝: 5克/25克/100克/1公斤 CAS號:9010-05-3 級別:BR 含量:≥90.0% 干燥失重:≤10.0% 性狀:微黃色至黃褐色粉末,溶于水 用途:生化研究。食品調(diào)味劑、核酸類藥物研究 保存:2~8℃ 乙型肝炎病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格人類狀瘤病毒16/18 E6抗體o-Acetoacetaniside別名: 分子式: C11H13NO3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: HA tag標(biāo)簽抗體N-Acetoacetylmorpholine別名: 分子式: C8H13NO3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 荷爾蒙敏感脂肪酶抗體N-(2-Methoxyphenyl)acetamide別名: 分子式: C9H11NO2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 血紅蛋白α1/α-Globin抗體4'-Methoxyacetanilide別名: 分子式: C9H11NO2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: Fas相互作用蛋白激酶2抗體N-Acetylsulfanilyl chloride別名: 分子式: C8H8ClNO3S性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: Fas相互作用蛋白激酶3抗體Androst-5-en-3-ol-7,17-dione aceta別名: 分子式: C21H28O4性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 人類皰疹病毒8抗體7-Keto-dehydroepiandrosrone別名: 分子式: C19H26O3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 磷化熱休克蛋白27抗體Sodium prasrone sulfa別名: 分子式: C19H27NaO5S性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 |