產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 產(chǎn)品名稱:口蹄疫病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格 英文名稱:FootandMouth Disease Virus(FMDV)RTPCR 編號(hào):HE30998-R 類別:PCR檢測(cè)試劑盒 儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。 ? 儲(chǔ)需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點(diǎn): 1.即開(kāi)即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡(jiǎn)單,定量準(zhǔn)確快速。 2. 引物經(jīng)過(guò)優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 十八醇/硬脂醇/脂蠟醇/1-羥基十八烷/1-十八醇/十八碳醇/十八脂肪醇/十八烷醇/1-十八烷醇/正十八醇/正十八烷醇/1-Octadecanol 質(zhì)量規(guī)格:AR 包裝;25g 十六醇/1-十六醇/鯨蠟醇/棕櫚醇/C16醇/1-十六烷醇/正十六烷醇/1-Hexadecanol 質(zhì)量規(guī)格:AR;98% 包裝;5g 十五醇/1-十五醇/十五烷醇/1-十五烷醇/1-Pentadecanol 質(zhì)量規(guī)格:金屬滴定指示劑 包裝;50mg 十四醇/肉豆蔻醇/1-十四醇/C14醇/豆蔻醇/正十四醇/正十四烷醇/1-十四烷醇/Tetradecanol 質(zhì)量規(guī)格:AR 包裝;1g 環(huán)己醇/六氫苯酚/脫氫催化劑1101型/安醇/六氫化酚/Cyclohexanol 質(zhì)量規(guī)格:AR 包裝;5g 2,5-二甲基環(huán)己醇/2,5-二甲基環(huán)已醇/1-羥基-2,5-二甲基環(huán)己烷/六氫對(duì)二甲苯酚/2,5-Dimethylcyclohexanol 質(zhì)量規(guī)格:IND 包裝;25g 3,5-二甲基-3-己醇/乙基異丁基甲基甲醇/3-羥基-3,5-二甲基己烷/3,5-Dimethyl-3-hexanol 質(zhì)量規(guī)格:IND 包裝;5g 3-甲基環(huán)己醇/間甲基環(huán)己醇/六氫甲酚/六氫間甲酚/3-Methylcyclohexanol 質(zhì)量規(guī)格:ACS reagent,95 % 包裝;1g 法尼醇/法呢醇/3,7,11-*基-2,6,10-十二烷三烯-1-醇/合金歡醇/里哪醇/菌綠烯醇/Farnesol 質(zhì)量規(guī)格:指示劑 包裝;25g 正庚醇/葡萄花醇/1-庚醇/庚醇/1-Heptanol 質(zhì)量規(guī)格:IND 包裝;5g 1-辛醇/正辛醇/亞羊脂醇/伯辛醇/正辛烷醇/n-Octanol 質(zhì)量規(guī)格:ACS 包裝;25g 松節(jié)油透醇/松油醇/萜品醇/萜二醇/2-(4-甲基-3-環(huán)基)-2-丙醇松脂醇/松油腦/萜松醇/羥四甲六碳烯環(huán)/異松節(jié)油透醇/松油萜醇/松脂醇/1-甲基-4-異丙基-1-環(huán)-8-醇/Terpineol 質(zhì)量規(guī)格:BS 包裝;5g 四氫糠醇/四氫化麩醇/四氫化呋喃-2-甲醇/四氫化氧雜茂-2-甲醇/四氫-2-呋喃甲醇/四氫糠醛/四甲醇/四氫葉醇/四氫氧雜茂甲醇/四-2甲醇/THFA 質(zhì)量規(guī)格:IND 包裝;1g 環(huán)戊醇/羥基環(huán)戊烷/環(huán)戊甲醇/羰基環(huán)戊烷/環(huán)己戊醇/己戊醇/Cyclopentanol 質(zhì)量規(guī)格:BS 包裝;25g 仲辛醇/2-辛醇/甲基己基甲醇/第二辛醇/2-羥基辛烷/辛醇-2/另辛醇/(+)-2-辛醇/DL-2-辛醇/2-Octanol 質(zhì)量規(guī)格:IND 包裝;5g /四羥甲基甲烷,2,2-雙羥甲基-1,3-,五赤蘚醇/四羥甲基烷/單烷基醚磷酸酯三乙醇胺鹽/陰離子表面活性劑PET/單/Pentaerythritol 質(zhì)量規(guī)格:IND 包裝;100g 角鯊?fù)?異三十烷/鯊?fù)?2,6,10,15,19,23-六甲基二十四烷/全氫化角鯊烯/十二氫角鯊烯/鯊魚(yú)烷/奧芬達(dá)唑雜質(zhì)D/角霎烷/全氫鯊烯/Squalane 質(zhì)量規(guī)格:Indicator 包裝;25g 口蹄疫病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格Pusillimonas│sp. 中文名稱:極小單胞菌種屬:Pusillimonas│sp.分離基物:樣/近岸表層海提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:能夠降解石油,柴油等烷烴類物質(zhì),可用于生物修復(fù)。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:472生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:99% Patulibacter│minatonensis 中文名稱:港區(qū)散生桿菌種屬:Patulibacter│minatonensis分離基物:沉積物/表層沉積物提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:有機(jī)污染物降解菌/(潛在的)苯酚降解菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Comamonas│composti 中文名稱:堆肥叢毛單胞菌種屬:Comamonas│composti分離基物:沉積物/表層沉積物提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:有機(jī)污染物降解菌/(潛在的)苯酚降解菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Raoulla│planticola 中文名稱:植生拉烏爾菌種屬:Raoulla│planticola分離基物:生物樣/野生鯔魚(yú)腸道內(nèi)容物提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:共生微生物/野生鯔魚(yú)腸道共生菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Rothia│amarae 中文名稱:污溝羅斯氏菌種屬:Rothia│amarae分離基物:生物樣/野生鯔魚(yú)腸道內(nèi)容物提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:共生微生物/野生鯔魚(yú)腸道共生菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Tamlana│crocina 中文名稱:藏紅花色濟(jì)州島古名菌種屬:Tamlana│crocina分離基物:沉積物/沙灘沉積物提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:;培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:25–30℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Exiguobacterium│profundum 中文名稱:深海微小桿菌種屬:Exiguobacterium│profundum分離基物:沉積物/表層沉積物提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:潛在的無(wú)機(jī)污染物抗性菌/分離自Cr富集菌群培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:1001生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:95% Pleosporales│sp. 中文名稱:格孢腔菌種屬:Pleosporales│sp.分離基物:生物樣/海巴戟天-皮提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:近海絲狀真菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法 純度:95% 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 |