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小反芻獸疫病毒(PPRV)核酸試劑盒說(shuō)明書(shū)

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更新日期:
2020-11-20
點(diǎn)擊次數(shù):
821
產(chǎn)品特點(diǎn):
小反芻獸疫病毒(PPRV)核酸試劑盒說(shuō)明書(shū)實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
  48T小反芻獸疫病毒(PPRV)核酸試劑盒說(shuō)明書(shū)的詳細(xì)資料:

實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

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產(chǎn)品名稱

小反芻獸疫病毒(PPRV)核酸試劑盒說(shuō)明書(shū)

 規(guī)格

 48T/盒

 貨號(hào)

 HE32265-R

使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見(jiàn)下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
    1.   特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
    2.   重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
    3.   靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
    4.   實(shí)用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
     5.   優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
    6.   優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
四正辛基溴化銨14866-33-2金絲桃素乳桿菌選擇性培養(yǎng)基(LBs瓊脂)98%

四正辛基溴化銨14866-33-2絞股藍(lán)皂苷馬鈴薯瓊脂98%

碳雙(三苯基膦)氯化銥14871-41-1苦杏仁苷酪胨-卵磷脂-吐溫20液體培養(yǎng)基基礎(chǔ)95%

碳雙(三苯基膦)氯化銥14871-41-1苦參堿腸球菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)(疊氮鈉-結(jié)晶紫-七葉苷瓊脂)95%

(2,2-Bipyridine)Dichloropalladium(Ⅱ)14871-92-2氧化苦參堿(苦參素)擬桿菌選擇性培養(yǎng)基基礎(chǔ)(改良GAM瓊脂基礎(chǔ))97%

順-二氯雙(吡啶基)鉑(II)14872-21-0咖啡酸去氧膽酸鹽檸檬酸鹽瓊脂99%

順-二氯雙(吡啶基)鉑(II)14872-21-0硫辛酸改良Y培養(yǎng)基99%

雙(苯)二氯鉑(II), Pt min14873-63-3鹽酸氨基葡萄糖梭菌增菌培養(yǎng)基Pt ≥41%

雙(苯)二氯鉑(II), Pt min14873-63-3羅通定R2A 瓊脂Pt ≥41%

二羰基乙酰酮銠(I)14874-82-9落新婦苷厭氧液體培養(yǎng)基99%

三(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮酸)鈷(III) (metals basis)14877-41-9蘆丁厭氧瓊脂≥99%

鹽酸伊伐布雷定148849-67-6雷公藤甲素雙歧桿菌生化用基礎(chǔ)培養(yǎng)基≥98%

Fmoc-哌啶-4-甲酸148928-15-8雷公藤乙素EC-MUG培養(yǎng)基97%

環(huán)烷甲1489-69-6雷公藤紅素MUG營(yíng)養(yǎng)瓊脂(NA -MUG)98%

環(huán)烷甲1489-69-6雷公藤內(nèi)酯甲MMO-MUG98%
小反芻獸疫病毒(PPRV)核酸試劑盒說(shuō)明書(shū)人胎盤生長(zhǎng)因子(PLGF)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Escherichia  coli

小鼠胎盤生長(zhǎng)因子(PLGF)ELISA Kit,48T/96T 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

大鼠胎盤生長(zhǎng)因子(PLGF)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Pseudomonas fluorescens

人P選擇素(P-Selectin/CD62P)ELISA Kit,48T/96T 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

小鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Actinotalea arctic

大鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Absidia coerulea

人正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RANTES)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Candida  shehatae

小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RANTES)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Dietzia cercidiphylli 

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 小反芻獸疫病毒(PP PCR檢測(cè)試劑盒 48T
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