產(chǎn)品名稱:偷死野田村病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格 英文名稱:Covert Mortality Nodavirus(CMNV)RTPCR 編號:HE30856-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。 產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 ? 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點(diǎn): 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 L-賴氨酸醋酸/L-醋酸賴氨酸/L-2,6-二氨基己酸醋酸鹽/L-Lysine acetate salt 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;25g D-苯甘氨酸/左旋苯甘氨酸/(R)-α-氨基/D(-)-α-氨基/D-(-)-α-苯基甘氨酸/(S)-(+)-2- 苯基甘氨酸/D-Phenylglycine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;5g DL-正纈氨酸/DL-2-氨基正戊酸/DL-戊氨酸/DL-2-氨基戊酸/DL-Norvaline 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;1g L-2-氨基丁酸/L(+)-2-氨基丁酸/S-2-氨基丁酸/L(-)2-氨基丁酸/L-α-氨基正丁酸/L-α-氨基丁酸/L-2-Aminobutyric acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;250mg D-2-氨基丁酸/D(-)-2-氨基丁酸/D-a-氨基酪酸/D-a-氨基正丁酸/(R)-2-氨基丁酸/2-氨基丁酸/D-2-Aminobutyric acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;1g DL-2-氨基丁酸/DL-α-氨基丁酸/2-氨基丁酸/α-氨基丁酸/DL-α-氨基酪酸/DL-2-Aminobutyric acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;25g L-高苯丙氨酸/S-苯基丁氨酸/L-2-氨基-4-苯基丁酸/(S)-2-氨基-4-苯基丁酸/L-4-苯基-2-氨基丁酸/(+)-2-氨基-4-苯基丁酸/L-同苯基丙氨酸/L-Homophenylalanine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;5g D-高苯丙氨酸/D-苯基丁氨酸/R-苯基丁氨酸/D-Homophenylalanine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;1g DL-高苯丙氨酸/2-氨基-4-苯基丁酸/DL-Homophenylalanine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g L-高苯丙氨酸乙酯鹽酸鹽/(S)-(+)-2-氨基-4-苯基丁酸乙酯鹽酸鹽/L-Homophenylalanine ethyl ester hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR 包裝;5g BOC-L-高苯丙氨酸/(S)-2-(叔丁氧羰基氨基)-4-苯基丁酸/BOC-L-Homophenylalanine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,進(jìn)分 包裝;100mg BOC-D-高苯丙氨酸/(R)-2-(叔丁氧羰基氨基)-4-苯基丁酸/BOC-D-Homophenylalanine 質(zhì)量規(guī)格:>90%,粉末,進(jìn)分 包裝;25mg 甘氨酸鈉/甘氨酸單鈉鹽/氨基乙酸鈉/Sodium Glycinate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;500mg L-脯氨醇/L-(+)-羥甲基吡咯烷/(S)-L-脯氨醇/(S)-(+)-脯氨醇/L-Prolinol 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;25ml 無肌酸/N-(氨基亞氨基甲基)-N-甲基甘氨酸/N-胺肉胺酸/α-甲胍乙酸/N-甲基胍基乙酸/Creatine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;100mg N-乙酰-L-纈氨酸/L-2-乙酰氨基-3-甲基丁酸/N-乙酰基-L-穿心排草氨基酸/N-乙?;?L-纈氨酸/N-Acetyl-L-Valine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;500mg N-乙酰-DL-蛋氨酸/N-乙酰-DL-甲硫氨酸/N-乙?;?DL-甲硫氨酸/N-乙酰蛋氨酸/N-乙酰-DL-甲硫氨基酸/乙酰-DL-甲硫氨基丁酸/N-Acetyl-DL-Methionine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;1g 偷死野田村病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格 Ascochyta│citrullina 中文名稱:西瓜殼二孢(瓜類蔓枯病菌)種屬:Ascochyta│citrullina提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25℃ 純度:98% Thermoanaerobacter│mathranii 中文名稱:馬瑞氏熱厭氧桿菌(00開頭的農(nóng)業(yè)均無法提供)種屬:Thermoanaerobacter│mathranii分離基物:油田采出提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)甲烷培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:482生長條件:65℃存儲條件:定期移植法 純度:98% Methylobacterium│aquaticum 中文名稱:甲基桿菌種屬:Methylobacterium│aquaticum分離基物:土壤提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:分類、研究,可以用來生物肥料。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:65生長條件:28℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:98% Pholiota│squarrosoides 中文名稱:尖磷黃傘種屬:Pholiota│squarrosoides提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25℃ 純度:97% Xanthomonas│translucens 中文名稱:半透明黃單胞菌種屬:Xanthomonas│translucens分離基物:草魚腸胃道提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:飼料用木聚糖酶、葡聚糖酶、蛋白酶、植酸酶等的篩選培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:37℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:97% Alternaria solani 中文名稱:茄鏈格孢(番茄早疫病菌)種屬:Alternaria solani提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:分類;研究;培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷酸二氫鉀 3g,硫酸鎂 1.5g,葡萄糖 20g,維生素B1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。生長條件:25℃,好氧 純度:97% Fusarium oxysporum f. sp. cucumerinum 中文名稱:尖鐮孢黃瓜專化型(斜面)種屬:Fusarium oxysporum f. sp. cucumerinum提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:分類;研究;黃瓜枯萎病菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:PDA 培養(yǎng)基: :馬鈴薯提取液 1.0 L,葡萄糖 20.0 g,瓊脂 15.0 g,自然pH。傳代方法①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌或培養(yǎng)基:充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。生長條件:28℃,好氧存儲條件:2-8℃冷藏 純度:97% Bacillus│subtilis subsp. Inaquosorum 中文名稱:枯草芽孢桿菌沙漠亞種種屬:Bacillus│subtilis subsp. Inaquosorum提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:441生長條件:37℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:97% |