產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 產(chǎn)品名稱:小鼠白血病病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格 英文名稱:Mouse Leukemia Virus(MLV)RTPCR 編號:HE31228-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。 ? 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點(diǎn): 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 苦蘇花皂苷C英文名稱 Picropodophyllotoxin分 子 量: 414.41CAS NO.: 477-47-4純 度: ≥98%分子式: C22H22O8性狀: 白色結(jié)晶粉末規(guī)格: 20mg/50mg/1g,可按客戶需求包裝!用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實(shí)驗(yàn)等熔點(diǎn): 225-227℃溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有機(jī)溶劑;提取來源: 小檗科植物八角蓮Dysosmaversipellis(Hance.)M.Cheng的根莖,桃兒七藥理藥效: 苦鬼臼毒素具有抗病毒的作用鑒別方法: NMR;Ms檢測方法: 乙腈:0.2%磷酸水=35:65 波長=292nm貯存條件: 低溫冷藏,避光,密封,干燥注意事項(xiàng): 補(bǔ)充中 苦杏仁苷英文名稱 1-Caffeoylquinic acid分 子 量: 354.309CAS NO.: 1241-87-8純 度: ≥98%分子式: C16H18O9性狀: 淡黃色結(jié)晶粉末規(guī)格: 20mg/50mg/1g,可按客戶需求包裝!用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實(shí)驗(yàn)等熔點(diǎn): 234.5 °C溶解性: 可溶于水,易溶于熱水、甲醇、乙醇、丙酮等親水性溶劑,微溶于乙酸乙酯,難溶于、、苯等親脂性有機(jī)溶劑。提取來源: 金銀花藥理藥效: 消炎、抗病毒作用鑒別方法: NMR;Ms檢測方法: 乙腈:0.2%磷酸水溶液 0-30min 5-70 95-30 波長:237nm貯存條件: 低溫冷藏,避光,密封,干燥注意事項(xiàng): 補(bǔ)充中 苦玄參苷ⅠB英文名稱 Picfeltarraenin IB分 子 量: 792.95CAS NO.: 97230-46-1純 度: ≥98%分子式: C42H64O14性狀: 白色結(jié)晶性粉末規(guī)格: 20mg/50mg/1g,可按客戶需求包裝!用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實(shí)驗(yàn)等熔點(diǎn): 補(bǔ)充中溶解性: 可溶于水、DMSO等溶劑,不溶于石油醚。提取來源: 苦玄參藥理藥效: 苦玄參苷IB具有抗炎、抗腫瘤、抗氧化、抗疲勞、降血糖、保肝、增強(qiáng)免疫的作用鑒別方法: NMR;Ms檢測方法: HPLC:乙腈:水(35:65) λ:264nm(僅供參考)或乙腈-0.2%磷酸水溶液(40:70) 波長:261nm貯存條件: 低溫冷藏,避光,密封,干燥注意事項(xiàng): 補(bǔ)充中 苦玄參苷IA英文名稱 aMarogentin分 子 量: 586.54CAS NO.: 21018-84-8純 度: ≥98%分子式: C29H30O13性狀:規(guī)格: 20mg/50mg/1g,可按客戶需求包裝!用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實(shí)驗(yàn)等熔點(diǎn):溶解性:提取來源:藥理藥效:鑒別方法: NMR;Ms檢測方法:貯存條件: 低溫冷藏,避光,密封,干燥注意事項(xiàng): 苦玄參苷IB英文名稱 Sulforaphene分 子 量: 175.27176CAS NO.: 592-95-0純 度: ≥98%分子式: C6H9NOs2性狀: 黃色液體規(guī)格: 20mg/50mg/1g,可按客戶需求包裝!用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實(shí)驗(yàn)等熔點(diǎn): 補(bǔ)充中溶解性: 能溶于水,易溶于乙酸乙酯和乙醇等有機(jī)試劑提取來源: 補(bǔ)充中藥理藥效: 抗癌、解毒、抗菌、抗氧化鑒別方法: NMR;Ms檢測方法: 補(bǔ)充中貯存條件: 低溫冷藏,避光,密封,干燥注意事項(xiàng): 補(bǔ)充中 款冬酮英文名稱 Phillygenin分 子 量: 372.41CAS NO.: 487-39-8純 度: ≥98%分子式: C21H24O6性狀: 白色結(jié)晶性粉末規(guī)格: 20mg/50mg/1g,可按客戶需求包裝!用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實(shí)驗(yàn)等熔點(diǎn): 補(bǔ)充中溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有機(jī)溶劑;提取來源: 連翹藥理藥效: 補(bǔ)充中鑒別方法: NMR;Ms檢測方法: RP-HPLC:甲醇:水:甲酸(15:85:1)λ:332nm(僅供參考)貯存條件: 低溫冷藏,避光,密封,干燥注意事項(xiàng): 補(bǔ)充中 喹乙醇英文名稱 Wilforine分 子 量: 867.85CAS NO.: 11088-09-8純 度: ≥98%分子式: C43H49NO18性狀: 白色結(jié)晶粉末規(guī)格: 20mg/50mg/1g,可按客戶需求包裝!用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實(shí)驗(yàn)等熔點(diǎn): 158-163 °C溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有機(jī)溶劑;提取來源: 雷公藤,山海棠藥理藥效: 雷公藤次堿具有殺蟲,抗腫瘤,抗炎的作用鑒別方法: NMR;Ms檢測方法: HPLC貯存條件: 低溫冷藏,避光,密封,干燥注意事項(xiàng): 補(bǔ)充中 拉肖皂苷元英文名稱 Cycleanine分 子 量: 622.75CAS NO.: 518-94-5純 度: ≥98%分子式: C38H42N2O6性狀: 白色結(jié)晶粉末規(guī)格: 20mg/50mg/1g,可按客戶需求包裝!用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實(shí)驗(yàn)等熔點(diǎn):溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有機(jī)溶劑;提取來源: 白藥子,地不容,光葉地不容,南輪環(huán)藤,四川輪環(huán)藤,瓦氏獨(dú)活,錫生藤藥理藥效: 輪環(huán)藤堿具有抗腫瘤,抗感染,抗寄生蟲病的作用鑒別方法: NMR;Ms檢測方法: HPLC貯存條件: 低溫冷藏,避光,密封,干燥注意事項(xiàng): 辣椒堿(合成)英文名稱 Veratric acid分 子 量: 182.17CAS NO.: 1993/7/2純 度: ≥98%分子式: C9H10O4性狀: 無色針狀結(jié)晶規(guī)格: 20mg/50mg/1g,可按客戶需求包裝!用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實(shí)驗(yàn)等熔點(diǎn): 180~181℃溶解性: 易溶于乙醇、。幾乎不溶于冷水,稍溶于沸水提取來源: 藜蘆,金蓮花藥理藥效: 藜蘆酸具有防治過敏性哮喘及過敏性鼻炎,抗心律失常的作用鑒別方法: NMR;Ms檢測方法: HPLC-ELSD:乙腈:水梯度洗脫 (僅供參考)貯存條件: 低溫冷藏,避光,密封,干燥注意事項(xiàng): 補(bǔ)充中 小鼠白血病病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格 Decitabine 地西他濱/ 5-氮雜-2'-脫氧胞嘧啶核苷別名: NSC 127716;Dacogen;DAC;5-Aza-2'-deoxycytidineCAS: 2353-33-5 3,4,5-三磷酸磷脂酰肌醇英文名稱: Phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate diC16 (PI(3,4,5)P3 diC16)CAS: 165689-82-7英文名稱: NicotinamideCAS: 98-92-0 Andrographolide 穿心蓮內(nèi)酯別名: AndrographisCAS: 5508-58-7分子量: 176.18儲存條件: RT Terbinafine (hydrochloride) 鹽酸特比萘酚CAS: 78628-80-5純度: ≥98%分子量: 201.24儲存條件: RT Rosmarinic acid 迷迭香酸別名: Labiatenic acidCAS: 20283-92-5CAS: 133868-46-9 儲存條件: 2-8°C Azithromycin 阿奇霉素別名: CP 62993;ZithromaxCAS: 83905-01-5分子量: 146.23儲存條件: 密封保存 Floxuridine 5-氟-2'-脫氧尿苷別名: 5-Fluorouracil 2'-deoxyriboside;FUDR;FdUrdCAS: 50-91-9儲存條件: RT純度: ≥80% Carbamazepine 卡馬西平別名: CBZ;NSC 169864;Tegretol;EpitolCAS: 298-46-4分子量: 434.88儲存條件: -20℃ 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 |