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腸道病毒通用PCR檢測試劑盒說明書

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更新日期:
2020-11-05
點(diǎn)擊次數(shù):
571
產(chǎn)品特點(diǎn):
腸道病毒通用PCR檢測試劑盒說明書實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
  50T腸道病毒通用PCR檢測試劑盒說明書的詳細(xì)資料:

特點(diǎn)優(yōu)勢:
    1.   特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
    2.   重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
    3.   靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
    4.   實(shí)用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
     5.   優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
    6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
?
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱

腸道病毒通用PCR檢測試劑盒說明書

 英文名稱

 Enterovirus(EV)RTPCR

 貨號(hào)

 HE30949-R

實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對照。7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
透析袋4000/Dialysis tubing 4000 質(zhì)量規(guī)格:>98%, Ind Grade 包裝;1g

透析袋6000/Dialysis tubing 6000 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC 包裝;1g

透析袋7000/Dialysis tubing 7000 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC 包裝;250mg

再生纖維素透析袋/Regenerated cellulose membrane tubing 質(zhì)量規(guī)格:BR 包裝;5g

(含0.1%溶液) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;10MG

再生纖維素透析袋(無溶液)/Regenerated cellulose membrane tubing 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 包裝;100mg

纖維素透析袋/Cellulose ester Dialysis membranes 質(zhì)量規(guī)格:>95%,分子生物學(xué)級(jí) 包裝;1g

雜交袋/Seal-A-Meal 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;100g

透析袋夾/Dialysis tubing closures 質(zhì)量規(guī)格:>99.5%(HPLC) 包裝;25g

硝酸纖維素薄膜/硝酸纖維素膜/NC/Nitroate cellulose sheets 質(zhì)量規(guī)格:>70.0%(HPLC) 包裝;5g

乙酸纖維素薄膜/乙酸纖維素膜/醋酸纖維素膜/醋纖膜/Cellulose acet layer sheets 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(HPLC) 包裝;1g

PVDF膜/二氟化樹脂膜/Polyvinylidene Fluoride Membrane 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC) 包裝;5g

尼龍膜N+/Hybond-N+ 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(HPLC) 包裝;5g

封口膜/封口薄膜/Parafilm 質(zhì)量規(guī)格: 包裝;5g

封板膜/封板紙/Microplate Sealers 質(zhì)量規(guī)格: 包裝;25g

微孔濾膜(混纖)/Millipore filter,相使用 質(zhì)量規(guī)格:>95%(TPO Method) 包裝;10g

F型微孔濾膜/Millipore filter(F type),聚偏氟乙烯膜,有機(jī)相使用 質(zhì)量規(guī)格: 包裝;5g
腸道病毒通用PCR檢測試劑盒說明書Brucella│ovis 中文名稱:綿羊布氏菌種屬:Brucella│ovis提供形式:凍干物安全等級(jí):3模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:分型用,強(qiáng)毒株  綿羊型(附睪)培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0112生長條件:37℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法 純度:>98.0%(GC)

Brucella│canis 中文名稱:犬布魯氏菌種屬:Brucella│canis提供形式:凍干物安全等級(jí):3模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0112生長條件:37℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法 純度:>98.0%(GC)

Leptospira│interrogans 中文名稱:問號(hào)狀鉤端螺旋體種屬:Leptospira│interrogans提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:血清學(xué)分型 Australis australis培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0114生長條件:37℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:>98.0%(GC)

Mycobacterium│triviale 中文名稱:次要分枝桿菌種屬:Mycobacterium│triviale提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:標(biāo)準(zhǔn)菌種,供菌型檢定用培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0125生長條件:37℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:>98.0%(GC)

Mycobacterium│ulcerans 中文名稱:潰瘍分枝桿菌種屬:Mycobacterium│ulcerans提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:標(biāo)準(zhǔn)菌種,供菌型檢定用培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0125生長條件:37℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:>98.0%(GC)

Mycobacterium│Mycobacterium agreste 中文名稱:鄉(xiāng)村分枝桿菌種屬:Mycobacterium│Mycobacterium agreste提供形式:凍干物安全等級(jí):3模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究培養(yǎng)方法生長條件:28存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:98%

Mycobacterium│Mycobacterium alvei 中文名稱:蜂房分枝桿菌種屬:Mycobacterium│Mycobacterium alvei提供形式:凍干物安全等級(jí):3模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究培養(yǎng)方法生長條件:28存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:98%

Mycobacterium│Mycobacterium gordonae 中文名稱:戈登分枝桿菌種屬:Mycobacterium│Mycobacterium gordonae提供形式:凍干物安全等級(jí):3模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究培養(yǎng)方法生長條件:37存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:98%

 

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 腸道病毒通用 PCR檢測試劑盒 50T
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