PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡(jiǎn)便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測(cè)的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決?？偟膩碚f，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。

?
熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測(cè)到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測(cè)，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測(cè)產(chǎn)物長(zhǎng)度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
?
熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國(guó)PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
細(xì)胞樣品細(xì)胞色素C蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測(cè)試劑盒　HIST1H ELISA Kit　20 ul

載玻片細(xì)胞樣品細(xì)胞色素C蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒　HMBOX1 ELISA Kit　100 ul

載玻片細(xì)胞樣品細(xì)胞色素C蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒　HIST1H2AC ELISA Kit　100 ul

冰凍切片組織細(xì)胞色素C蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒　HS3ST1 ELISA Kit　100 ul

石蠟切片組織細(xì)胞色素C蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒　HS1BP3 ELISA Kit　100 ul

細(xì)胞樣品細(xì)胞色素C蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒　HS2ST1 ELISA Kit　100 ul

細(xì)胞樣品細(xì)胞色素C蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒　HSBP1 ELISA Kit　20 ul

細(xì)胞色素C蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒　HSD11B2 ELISA Kit　100 ul

細(xì)胞色素C蛋白免疫共沉淀分析試劑盒　HSCB ELISA Kit　100 ul

細(xì)胞色素C蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒　HSD17B2 ELISA Kit　300 ul

性染色體分離（Ericsson法）試劑盒　HSD17B4 ELISA Kit　100 ul

性染色體分離（percoll法）試劑盒　HSD17B6 ELISA Kit　20 ul

性染色體分離（流式儀法）試劑盒　HIST2H2AA4 ELISA Kit　100 ul

細(xì)胞氧化應(yīng)激活性氧（ROS）細(xì)胞流式儀檢測(cè)試劑盒　HMCN1 ELISA Kit　100 ul

細(xì)胞氧化應(yīng)激活性氧超氧陰離子細(xì)胞流式儀檢測(cè)試劑盒　Histone-H3 ELISA Kit　300 ul

細(xì)胞BWW培養(yǎng)液　HIST3H2A ELISA Kit　400 ul
桃拉綜合癥病毒探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒多肽N-酰氨基半糖轉(zhuǎn)移酶10抗體MIP-3 Alpha  巨噬細(xì)胞炎性蛋白-3α100 ul

多肽N-酰氨基半糖轉(zhuǎn)移酶11抗體MIP-3 Beta  巨噬細(xì)胞炎性蛋白-3β300 ul

多肽N-酰氨基半糖轉(zhuǎn)移酶12抗體MIP-4  巨噬細(xì)胞炎性蛋白-4100 ul

多肽N-酰氨基半糖轉(zhuǎn)移酶1抗體MIP-5  巨噬細(xì)胞炎性蛋白-520 ul

晶狀體球蛋白γ3/γC-crystallin/白內(nèi)障相關(guān)蛋白抗體MCP-1  巨噬細(xì)胞趨化蛋白-1100µg

γ-微管蛋白復(fù)合物GCP3抗體mouse MMP-9  血清金屬基質(zhì)蛋白酶-9100 ul

胍基酸N甲基轉(zhuǎn)移酶抗體RANS  趨化因子100 ul

α-葡萄糖苷酶C抗體G-CSF  粒細(xì)胞-集落刺激因子100 ul

生長(zhǎng)激素釋放因子受體抗體GM-CSF  粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子100 ul