特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。
?
熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測并記錄其熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
?
熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
孔雀石綠PKM2 (D78A4) XP® Rabbit mAbL-賴氨酸

燦爛綠,亮綠Phospho-Drosophila Akt (Ser505) Antibody6-甲氧基-2,3,4,5-四氫吡啶

甲基綠THEX1 (D66A11) Rabbit mAb2,二氯-5-甲基吡啶

茜素綠;酸性綠25Phospho-Akt (Thr308) (244F9) Rabbit mAb(R)-縮水甘油

萘酚綠BPhospho-Akt (Thr308) (244F9) Rabbit mAb乙氧甲?；鶃喴一?/span>

固綠FCFPhospho-Akt (Ser473) (193H12) Rabbit mAb甲酸

子種綠A；藍(lán)APhospho-Akt (Ser473) (193H12) Rabbit mAb2-甲氧基基酸

亮綠SF(淡黃)Phospho-Akt (Ser473) (193H12) Rabbit mAb甲氧基酸

健那綠BAkt3 Antibody2,3,4,6-四乙酰氧基-alpha-D-吡喃葡萄糖溴化物

酸性綠3CNOT3 (D4K4N) Rabbit mAb1-叔丁氧羰基哌

酸性綠 50 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb氯-2-吡啶甲酸

酸性綠APhospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb2-溴蒽醌

吲哚菁綠Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAbN-BOC-GAMMA-氨基丁酸

靛藍(lán)N-Cadherin Antibody9-溴菲

甲基藍(lán)CD6 (E9Y7Y) Rabbit mAb戊鈉

伊文思藍(lán)；埃文斯藍(lán)MST3b Antibody2-氨基-氯-6-甲氧基嘧啶

曲利藍(lán)LSD1 (1B2E5) Mouse mAb5-氯-2-氟

維多利亞藍(lán)B,性藍(lán) 26CXXC1 (D1R5R) Rabbit mAb2-溴-5-氟
內(nèi)阿米巴通用探針法熒光PCR檢測試劑盒N-甲基-D-天門冬氨酸(NMDA)受體亞單位NR2 ELISA試劑盒TRBF1/TRF1  端粒體復(fù)制結(jié)合因子1抗體100 ul

N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒TREM1  髓系細(xì)胞觸發(fā)受體1抗體100 ul

NOGO-A ELISA試劑盒TREM2  髓系細(xì)胞觸發(fā)受體2抗體20 ul

Na-K-ATP酶ELISA試劑盒TREML1/TLT1  髓系細(xì)胞觸發(fā)受體樣轉(zhuǎn)錄因子1抗體100 ul

NAD(P)H脫氫酶(醌)1(NQO1)ELISA試劑盒TREML2/TLT2  髓系細(xì)胞觸發(fā)受體樣轉(zhuǎn)錄因子2抗體100 ul

M型肌酸激酶(CKM)ELISA試劑盒Transferrin  轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體100 ul

L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒TRF2  端粒結(jié)合蛋白2抗體100 ul

L-酸脫氫酶(L-LDH) ELISA試劑盒omerase Binding Proin, P23  端粒酶結(jié)合蛋白P23抗體100 ul

KiSS-1受體(KISS1R)ELISA試劑盒TRIM32  TRIM32抗體20 ul