實(shí)驗(yàn)外包: 1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析 2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq 3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM 4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR 5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA 6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選 7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR 8.細(xì)胞及動物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動物模型構(gòu)建 服務(wù)流程: 接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。 ? 產(chǎn)品名稱 | ??刹《綪CR檢測試劑盒規(guī)格 ? | 英文名稱 | ECHO VirusRTPCR | 貨號 | HE30908-R |
使用方法: 一、樣品 DNA 的制備 用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。 二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。 1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。 2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。 3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。 4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。 5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。 6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對照。7. NC 管中不加任何陽性對照。 8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟: 方法 1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5 μl dNTP mix (2mM) 4 μl 引物1(10pM) 2 μl 引物2(10pM) 2 μl Taq酶 (2U/μl) 1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。 3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 特點(diǎn)優(yōu)勢: 1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。 2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。 3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。 4. 實(shí)用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。 5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。 6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。 β-環(huán)糊精/環(huán)麥芽七糖/β-Cyclodextrin 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 包裝;250mg 羥丙基-β-環(huán)糊精/羥丙基倍他環(huán)糊精/2-羥丙基-β-環(huán)糊精/HPBCD/HPCD 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 包裝;5g 羥乙基-β-環(huán)糊精/(2-Hydroxyethyl)-β-Cyclodextrin 質(zhì)量規(guī)格:>98%,DNMT抑制劑 包裝;50mg 磺丁基-β-環(huán)糊精/磺丁基醚-β-環(huán)糊精/硫代丁基醚-β-環(huán)糊精鈉/磺丁基醚倍他環(huán)糊精/硫代丁基醚倍他環(huán)糊精鈉/Sulfobutylether-β-Cyclodextrin 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 包裝;25g 甲基-β-環(huán)糊精/2,6-二甲基-β-環(huán)糊精/甲基倍他環(huán)糊精/Methyl-β-cyclodextrin 質(zhì)量規(guī)格:>98%,TLR7/TLR8激動劑 包裝;5g γ-環(huán)糊精/γ-Cyclodextrin 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 包裝;1g D-果糖/D-左旋糖/果糖/ D-(-)-果糖/D-阿拉伯型已酮糖/果糖/D-Fructose 質(zhì)量規(guī)格:UV法溶出度檢查 包裝;5g D-果糖-6-磷酸二鈉/6-磷酸果糖二鈉/F6P 質(zhì)量規(guī)格:UV法含量測定 包裝;1g D-果糖-1,6-二磷酸三鈉/1,6-二磷酸果糖三鈉鹽/FDP 質(zhì)量規(guī)格:供鑒別用 包裝;5g D-氨基半乳糖鹽酸鹽/D-半乳糖胺鹽酸鹽/2-氨基-2-脫氧-D-半乳糖鹽酸鹽/D-軟骨糖胺鹽酸鹽/2-氨基-2-脫氧-D-解乳糖鹽酸鹽/D-Galactosamine HC1 質(zhì)量規(guī)格:溶出度檢查 包裝;1g D-半乳糖醛酸/右旋解乳糖醛酸/D-(+)-Galacturonic acid 質(zhì)量規(guī)格:UV法溶出度檢查 包裝;5g D-葡萄糖一物/一葡萄糖/D-吡喃葡糖一合物/葡萄糖/D(+)-葡萄糖一/α-D-葡萄糖/右旋糖/D-Glucose monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 包裝;1g 無葡萄糖/D-葡萄糖無物/無α-D-葡萄糖/無右旋糖/D-無葡萄糖/血糖/β-D-無葡萄糖/D-Glucose anhydrous 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 包裝;25g D-葡萄糖-6-磷酸三鈉鹽/6-磷酸葡萄糖三鈉鹽/6-磷酸葡萄糖酸三鈉鹽/G-6-P-Na3 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 包裝;5g D-葡萄糖-6-磷酸二鈉鹽/6-磷酸葡萄糖二鈉鹽/6-磷酸葡萄糖酸二鈉鹽/G-6-P-Na2 質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定 包裝;1g D-葡萄糖-6-磷酸單鈉鹽/β-D-葡萄糖-6-磷酸鈉鹽/6-磷酸葡萄糖鈉鹽/6-磷酸葡萄糖酸一鈉鹽/G-6-P-Na 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;1g D-葡萄糖-1-磷酸二鈉/1-磷酸葡萄糖二鈉鹽/1-磷酸葡萄糖酸二鈉鹽/G-1-P-Na2 質(zhì)量規(guī)格:UV法含量測定 包裝;250mg 埃可病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格 Pseudonocardia│dioxanivorans 中文名稱:嗜二氧雜環(huán)乙烷假諾卡氏菌種屬:Pseudonocardia│dioxanivorans提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0810生長條件:28C存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥 純度:98% Escherichia│coli 中文名稱:大腸埃希氏菌DH5α/pET30a-PknB種屬:Escherichia│coli提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:保存PknB基因,用于pknB蛋白表達(dá)培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:LB+kanamycin+chloramphenicol (25微克每毫升)生長條件:37C存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥 純度:98% Escherichia│coli 中文名稱:大腸埃希氏菌DH5a/phA3G-EGFP種屬:Escherichia│coli提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:保存Human APOBEC3G基因的基因工程細(xì)菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0033生長條件:37C存儲條件:液氮超低溫凍結(jié) 純度:98% Thermomonospora│sp. 中文名稱:高溫單孢菌屬種屬:Thermomonospora│sp.分離基物:土壤提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:AHBA合酶基因陽性培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0027生長條件:28C存儲條件:真空冷凍干燥 純度:90% Streptomyces│pseudovenezuelae 中文名稱:假刺孢鏈霉菌種屬:Streptomyces│pseudovenezuelae提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0312生長條件:28C存儲條件:真空冷凍干燥 純度:90% Nocardia│sp. 中文名稱:諾卡氏菌屬菌株種屬:Nocardia│sp.分離基物:土壤提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:抗金黃色葡萄球菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0027生長條件:28C存儲條件:真空冷凍干燥 純度:90% Aspergillus│sp. 中文名稱:曲霉屬種屬:Aspergillus│sp.分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:活性物質(zhì);抗凝血培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0014生長條件:28C存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié) 純度:98% Escherichia│coli 中文名稱:大腸埃希氏菌DH5α/pET28a-akt1種屬:Escherichia│coli提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:保存akt1基因,用于akt1蛋白表達(dá)培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:LB+kanamycin+chloramphenicol (25微克每毫升)生長條件:37C存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥 純度:98% |