PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡(jiǎn)便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測(cè)的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決?？偟膩碚f，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。

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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測(cè)到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測(cè)，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測(cè)產(chǎn)物長(zhǎng)度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
普魯蘭糖;普魯蘭多糖C24H39NO7鄰氯甲肟

維生素 E, 酚C38H34O16(基偶氮)酚

司他夫定C37H32O161-甲基-正

司他夫定(標(biāo)準(zhǔn)品)C45H76O192-甲氧基喹啉-酸

嗎氯貝C51H82O2(R)-(+)-2-(甲氧甲基)-1-吡咯烷甲

嗎氯貝(標(biāo)準(zhǔn)品)C22H20O12十七氟正壬酸乙酯

黃芪甲苷(標(biāo)準(zhǔn)品)C19H18NO4硝基水楊酸甲酯

黃芪甲苷C27H30O15基硫代膦酰二氯

那格列奈（標(biāo)準(zhǔn)品）C19H16O61-叔丁氧碳基-吡咯烷酮

那格列奈C48H78O18草氨酸

那格列奈C42H64O14氧基酸

丁溴東莨菪  C20H18O11乙酰乙酸異戊酯

單寧酸,鞣酸,丹寧酸C47H72O18季戊四四甲酸酯

馬拉韋若C26H28O155-氟-2-甲

群勃龍醋酸酯 C17H16O5羥基磺酰

水飛薊賓(標(biāo)準(zhǔn)品)C20H22O9阿尼西坦

水飛薊賓C6H10S22-辛基琥珀酸酐(順反異構(gòu)體混和物)

依澤替米貝;依折麥布C15H14O31-(氯基)哌啶鹽酸鹽
分歧巴貝斯蟲探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒β氨基己糖苷酶A(β-Hex A)ELISA試劑盒C-Met/Met/HGFR  肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體抗體5 mg

β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA試劑盒Phospho-Met (Tyr1003)  酸化肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(原癌基因)抗體300 ul

β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)ELISA試劑盒Phospho-Met (Tyr1234/1235)  酸化肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(原癌基因)抗體100 ul

β1腎上腺素能受體(β1AR)抗體ELISA試劑盒Phospho-Met (Tyr1349)  酸化肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(原癌基因)抗體300 ul

α羥基丁酸脫氫酶(αHBDH)ELISA試劑盒CMKLR1/CHEMR23  趨化樣因子受體1抗體100 ul

α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)ELISA試劑盒MTLC/C-myc  致癌基因抗體500 ul

α-黑色素細(xì)胞刺激素(α-MSH)ELISA試劑盒phospho C-Myc(Thr58/pSer62)  酸化致癌基因C-Myc抗體100 ul

α谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(α-GST)ELISA試劑盒phospho C-Met/HGFR(Tyr1365)  酸化原癌基因c-Met抗體100 ul

α甘露糖苷酶(α Manase)ELISA試劑盒c-Myc tag  c-Myc tag標(biāo)簽抗體100 ul