產(chǎn)品僅用于科研注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品名稱：漢扎洛瓦病毒PCR檢測試劑盒
英文名稱：Hanzalova Virus RTPCR
編號：HE31059-R
類別:PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
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儲需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
特點：
1.即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單，定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化，特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照，便于分析試驗結(jié)果。
保存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
氨基脲/氨基甲酰肼/氨脲/氨基甲秈肼/胺甲鹽肼/胺脲/半卡肼/Semicarbazide 包裝;100g

芥子酸/3,5-二甲氧基-4-羥基肉桂酸/咖啡酸反式異構(gòu)體/3,5-二甲氧基-4-羥基-反式-苯乙烯酸/3,5-二甲氧基-4-羥基苯酸/順13-二十二烯酸/順二十二碳-13-烯酸/3,5-二甲氧基-4-羥基桂皮酸/Sinapic acid 包裝;500g

苯磺酸鈉/Sodium benzenesulfonate 包裝;1g

癸酸鈉/Sodium decanoate 包裝;100g

鄰苯二甲酸氫鈉/苯二甲酸氫鈉/1,2-苯二羧酸單鈉鹽/鄰苯二甲酸鈉鹽/苯二甲酸氫鈉/酞酸氫鈉/Sodium hydrogen phthalate 包裝;25g

草氨酸鈉/Sodium oxamate 包裝;5g

D-泛酸鈉/右旋泛酸鈉/(R)-N-(2,4-二羥基-3,3-二甲基-1-氧代丁基)- β-丙氨酸單鈉鹽/D-本多生酸鈉/泛酸鈉/D(+)-泛酸鈉/Sodium D-pantothenate 包裝;1g

高酸鈉/過酸鈉/偏高酸鈉/Sodium periodate 包裝;5g

苯酸鈉/Sodium phenylpyruvate 包裝;1g

亞磷酸氫二鈉五合物/五亞磷酸鈉/Sodium phosphite dibasic pentahydrate 包裝;250mg

磷鉬酸鈉/鉬磷酸鈉/Sodium phosphomolybdate hydrate 包裝;5g

乙酸鍶/醋酸鍶/Strontium acetate 包裝;100g

氟化鍶/二氟化鍶/Strontium fluoride 包裝;25g

丁香醛/3,5-二甲氧基-4-羥基/Syringaldehyde 包裝;1g

丁香酸/4-羥基-3,5-二甲氧基苯甲酸/3,5-二甲氧基-4-羥基苯甲酸/4-羥基-3,5-二甲氧基甲酸/梧酸-3,5-二甲醚/紫丁香酸/Syringic acid 包裝;5g

牛磺去氧膽酸鈉/?；敲撗跄懰徕c/Sodium taurodeoxycholat 包裝;25g

4-甲苯磺酰氯/對甲苯磺酰氯/甲苯-4-磺酰氯/對氯化甲苯砜/PTSC 包裝;5g
漢扎洛瓦病毒PCR檢測試劑盒Psychrobacter│alimentarius 中文名稱：消化嗜冷桿菌種屬:Psychrobacter│alimentarius分離基物:沉積物/深海沉積物提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:無機(jī)污染物抗性菌/抗重金屬鉻(Cr)培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:4℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：97%

Citricoccus│sp. 中文名稱：檸檬球菌種屬:Citricoccus│sp.分離基物:樣/海提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:大洋細(xì)菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:4℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：99%

Planococcus│sp. 中文名稱：動性球菌種屬:Planococcus│sp.分離基物:沉積物/深海沉積物提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:大洋細(xì)菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:4-20℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：99%

Salinibacterium│amurskyense 中文名稱：阿穆斯基灣鹽桿菌種屬:Salinibacterium│amurskyense分離基物:沉積物/深海沉積物提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:大洋細(xì)菌，產(chǎn)酶微生物/ 蛋白酶培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:4-20℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%

Tenacibaculum│aiptasiae 中文名稱：?？ぶ鴹U菌種屬:Tenacibaculum│aiptasiae分離基物:生物樣/?？ɑ疾〉模┨峁┬问?凍干物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:；培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%

Roseobacter│litoralis 中文名稱：海濱玫瑰桿菌種屬:Roseobacter│litoralis分離基物:不詳提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：97%

Oleispira│lenta 中文名稱：緩慢油螺旋菌種屬:Oleispira│lenta分離基物:樣/海提供形式:凍干物模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:；培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%

Roseivivax│halotolerans 中文名稱：玫瑰色鮮艷菌（加詞待譯）種屬:Roseivivax│halotolerans分離基物:生物樣/附生植物提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:；生物轉(zhuǎn)化微生物/含有細(xì)菌葉綠素；產(chǎn)酶微生物/產(chǎn)脲酶（Urease）培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
技術(shù)原理：
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實驗中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）
產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。