熒光染料的優(yōu)點：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設(shè)計和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決?？偟膩碚f，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實驗手段。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標記熒光基團，3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時，引物與該探針同時結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結(jié)合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點：
成本高；
設(shè)計難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
白三烯A4水解酶(LTA4H)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　谷氨酸棒狀桿菌（黃色短桿菌）*　25g

凝血因子Ⅺ(F11)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　大腸埃希菌　5g

肽聚糖識別蛋白1(PGLYRP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　福山假絲酵母　5g

17-β-羥基類固醇脫氫酶3(HSD17β3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　97%　鴨疫里氏桿菌　100g

C-Raf原癌基因絲蘇氨酸蛋白激酶(CRAF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　97%　橙色桿狀菌　25g

野鼠色基因相關(guān)蛋白(AGRP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　97%　褐球固氮菌*　500g

前膠原C端蛋白酶增強子1(PCPE1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　97%　埃切畢赤酵母　1g

腫瘤壞死因子配體超家族成員13(TNFSF13)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　97%　球孢白僵菌　25g

血小板反應(yīng)蛋白4(THBS4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　97%　多分枝靈芝　5g

轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族V成員1(TRPV1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　97%　植物乳桿菌　1g

早幼粒細胞白血病蛋白(PML)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　97%　美澳型核果褐腐病菌　250mg

細胞胱硫醚γ裂解酶(CSE)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　犁黑輪斑交鏈孢霉　25g

腱蛋白樣蛋白1(CHRDL1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　季也蒙邁耶氏酵母　5g

成纖維細胞激活蛋白α(FAPα)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　空腸彎曲桿菌　1g

NFKB抑制因子(NKRF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　宇佐美曲霉　5g

饑餓素-O-?；D(zhuǎn)移酶(GOAT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　97%　貝氏葡萄座腔菌　100g

胸腺基質(zhì)淋巴細胞生成素(TSLP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　97%　類產(chǎn)堿假單胞菌　25g

卵脂膽固醇脂酰轉(zhuǎn)移酶(LCAT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　97%　釀酒酵母　5g
多瘤病毒探針法熒光PCR檢測試劑盒α-s2酪蛋白抗體HGV(Hepatitis G vivus)  庚型肝炎病毒（抗原）20 ul

組織蛋白酶B抗體HisX6  聚組氨酸標簽蛋白50 ml

CXCL10趨化因子10/干擾素誘導(dǎo)蛋白10抗體HIV-1(gp41)  艾滋病病毒（抗原）500 ml

CXC趨化因子14抗體HIV gp120  艾滋病病毒（抗原）100 ul

酪蛋白抗體HSP-60( Heat shock proin-60)  熱休克蛋白-60（抗原）20 ul

補體4結(jié)合蛋白HSP-70 peptide  熱休克蛋白-70（多肽抗原）100 ul

NK細胞抑制性受體3DL1抗體alpha Adaptin/AP1  銜接蛋白α抗原20 ul

9號染色體開放閱讀框116抗體ICAD(Inhibitor of Caspase-Activad DNase )  Caspase 激活的脫氧核糖核酸酶抑制劑（抗原）100 ul

酸化原癌基因c-Jun抗體IDE, (Insulin degradation enzyme)  胰島素降解酶（抗原）100 ul
PCR技術(shù)的定量原理：
擴增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應(yīng)擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應(yīng)的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。