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山羊皰疹病毒2型探針法熒光PCR檢測試劑盒

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更新日期:
2024-08-19
點擊次數(shù):
646
產品特點:
山羊皰疹病毒2型探針法熒光PCR檢測試劑盒注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
  50次山羊皰疹病毒2型探針法熒光PCR檢測試劑盒的詳細資料:

樣品RNA的抽提:
產品僅用于科研取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。
2 RNA質量檢測
1)紫外吸收法測定
先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
① 濃度測定
A260下讀值為1表示40 g RNA/ml。樣品RNA濃度(g/ml)計算公式為:A260 ×稀釋倍數(shù)× 40 g/ml。

 產品名稱

山羊皰疹病毒2型探針法熒光PCR檢測試劑盒

 英文名稱

 Caprine Herpesvirus 2(CpHV-2)

 貨號

 YSP96523

實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μ
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
      加ddH2O至               50 μl
   視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。好設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.產品僅用于科研所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。

熒光定量PCR試劑盒技術:
本實用新型技術公開了一種實時熒光定量PCR試劑盒,包括盒體,盒體由上盒體和下盒體組成,上盒體的底面上設有限位凸起,下盒體的頂面上設有與限位凸起匹配的凹槽,且在下盒體左右側壁的下端均軟連接有側蓋,側蓋遠離下盒體的一端連接有卡勾,下盒體的上端邊緣處設有環(huán)形凸起,兩個卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上;凹槽的內部設有固定桿,固定桿上通過轉動件轉動連接有用于放置試管的試管架;下盒體的左右兩側均設置有收納槽。本實用新型技術通過將盒體分為上下組合的兩個部分,并將兩個部分通過側蓋連接,即可保證試劑盒的便攜性,同時使用試劑盒自帶的試管可提高檢測的效率。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
乙縮(Standard for GC,>99%(GC))Ku80 (C48E7) Rabbit mAb2,二溴噻唑

乙酰酮(Standard for GC,≥99.6%(GC))Ku80 (C48E7) Rabbit mAb2,5-二溴噻唑

酸丁酯(BA)(Standard for GC,≥99.5%(GC))Phospho-Rb (Ser608) Antibody溴-甲

仲丁基(Standard for GC,>99.0%(GC))Phospho-Rb (Ser608) Antibody氯-4'-羥基二甲酮

正丁(standard for GC,>99.5%(GC))eIF4G2/p97 Antibody叔丁基芐

正戊(Standard for GC,>99.5%(GC))NFAT3 (23E6) Rabbit mAb5-乙基尿嘧啶

叔丁基(Standard for GC, ≥99.5% (GC))LSD1 (C69G12) Rabbit mAb2-基-5-氟溴芐

溴(Standard for GC,>99.5%(GC))CENP-A Antibody溴-5-(三氟甲基)甲

丁酸丁酯(Standard for GC,≥99.5%(GC))CENP-A Antibody2-氨基-基吡啶

1,丁炔二(Standard for GC, ≥99.5% (GC))Phospho-CENP-A (Ser7) Antibody2,6-二氯吡

叔丁(standard for GC,≥99.5%(GC))NFAT3 (31G6) Rabbit mAb2-氯-吡啶甲

2,丁二酮(standard for GC,≥99.0%(GC))P-Cadherin (C13F9) Rabbit mAb環(huán)己甲酸

癸二酸二辛酯(DOS)(Standard for GC, ≥98.5% (GC))P-Cadherin (C13F9) Rabbit mAb醌茜隱色體

溴代正丁烷(Standard for GC,>99.5%(GC))Nocodazole5-氯-1-茚酮

正丁硫(standard for GC,≥99%(GC))SRC-1 (128E7) Rabbit mAb1,二氯酞

乙酸仲丁酯(standard for GC, ≥99.5% (GC))Presenilin 2 Antibody2,2',4'-三氯乙酮

甲酸丁酯(Standard for GC)RPA70/RPA1 (C24F2) Rabbit mAbN-甲基異

一正丁(Standard for GC,≥99.7%(GC))MG-1322-溴-氟甲
山羊皰疹病毒2型探針法熒光PCR檢測試劑盒α-輔肌動蛋白4(ACTN-4)ELISA試劑盒Lgr5/GPR49  Lgr5/GPR49抗體100 ug

α-輔肌動蛋白3(ACTN-3)ELISA試劑盒LH  促黃體生成素抗體100µl

α-輔肌動蛋白1(ACTN-1)ELISA試劑盒LH  促黃體生成素抗體100 ul

α-防御素4(NP-4)ELISA試劑盒LH  促黃體生成素單克隆抗體100 ul

α淀粉酶(AMY1)ELISA試劑盒LH  促黃體生成素抗體100 ul

α半糖基(α-Gal)ELISA試劑盒LHR/CGR  促黃體生成素受體抗體100 ul

α半糖苷酶(αGAL)ELISA試劑盒HDC  L-組氨酸脫羧酶抗體1 Kit

αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA試劑盒LHRH/GNRH   黃體激素釋放激素類似物抗體100µl

αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA試劑盒LIF  白血病抑制因子抗體100 ul

 

產品相關關鍵字: 山羊皰疹病毒2型 染料法 熒光PCR檢測試劑盒
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