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禽腺病毒探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒

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更新日期:
2024-08-26
點(diǎn)擊次數(shù):
778
產(chǎn)品特點(diǎn):
禽腺病毒探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
  50次禽腺病毒探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒的詳細(xì)資料:

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產(chǎn)品名稱

禽腺病毒探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒

英文名稱

 Avian Adenovirus

貨號(hào)

 YSP96394

熒光染料的優(yōu)點(diǎn):
產(chǎn)品僅用于科研使用簡(jiǎn)便;
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合;
價(jià)格便宜;
熒光染料的缺點(diǎn):
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測(cè)的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別,進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說,SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。
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熒光探針:
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針,其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針,該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán),3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近,熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí),引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上,探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí),Taq酶利用5'外切酶活性,將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來,從而使其發(fā)出熒光。檢測(cè)到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比,因此,根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題,反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測(cè),縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn):
熒光背景低;
敏感性高;
雜交穩(wěn)定性高;
熒光光譜分辨率好;
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn):
成本高;
設(shè)計(jì)難度大;
只能用于檢測(cè)產(chǎn)物長(zhǎng)度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性,可用于等位基因的辨別,特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術(shù)的定量原理:
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中,對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào),隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
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熒光定量PCR原理:
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國(guó)PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì),熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán),收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào),這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言,熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段:熒光背景信號(hào)階段,熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段,擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段, PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便,在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
孟魯司特鈉C26H29O16Cl2-氯-6-氟

孟魯司特鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)C26H29ClO151-基-(反-乙基環(huán)己基)

β-葡聚糖酶C16H22O4乙基酸

2-脫氧-L-胸苷/替比夫定C54H92O24四丁基氯化銨(水合物)

替比夫定(標(biāo)準(zhǔn)品)C54H92O24溴-5-氯甲

輪環(huán)藤寧/1,4,7,10- 四氮雜環(huán)十二烷 C48H82O192-溴喹喔啉

雷替曲塞C48H82O19(S)-(-)-1-(甲氧基)乙

L-鳥氨酸 L-天門冬氨酸鹽C30H46O3辛酸戊酯

雙嘧達(dá)莫C29H44O6氨基-7H-吡咯并[2,D]嘧啶硫酸鹽

他米巴羅汀C42H72O147-氧代-7-氮雜吲哚

文多靈C30H44O71-(2-吡啶)哌啶單鹽酸鹽

羅丹明B;玫瑰紅BC19H28O3基-氟酸

頭孢哌酮;頭孢哌酮酸C12H14O46-氯

頭孢哌酮(標(biāo)準(zhǔn)品)C16H22O111-溴-2,4,5-三氯

異硫酸羅丹明BC10H10O43,3'5,5'-四甲基聯(lián)雙酚二縮水甘油

羅丹明6G/性紅1/玫瑰紅6GC13H10O3甲-N,N-二甲基腙

麗絲羅丹明B/酸性紅52/磺酰羅丹明B C30H48O5FMOC-D-氨酸

麗絲羅丹明B/酸性紅52/磺酰羅丹明B C30H48O41-Boc-哌
禽腺病毒探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒酮酸激酶(PK)ELISA試劑盒CEA  癌胚抗原單克隆抗體(檢測(cè))100 ul

二酰輔酶A脫羧酶,線粒體(MLYCD)ELISA試劑盒CEAcam8/CD67  癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子8抗體100 ul

二酸單酰輔酶A(malonyl CoA) ELISA試劑盒cellulase  纖維素酶抗體100 ul

二(MDA)ELISA試劑盒CEBP-alpha   轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBP α 抗體100 ul

氨酸轉(zhuǎn)氨酶/谷轉(zhuǎn)氨酶(ALT/GPT)ELISA試劑盒Phospho-CEBP alpha (Ser21)  酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP α 抗體20 ul

表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)ELISA試劑盒Phospho-CEBP alpha (Thr222/226)  酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP α 抗體100 ul

表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISA試劑盒CEBP Beta  轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBP β抗體100 ul

氨酸(LPA)ELISA試劑盒Phospho-CEBP beta (Ser105)  酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP β抗體1 mg

胞外超氧化物歧化酶[Cu-Zn](SOD3)ELISA試劑盒Phospho-CEBP beta (Thr235)  酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP β抗體1 Kit

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 禽腺病毒 染料法 熒光PCR檢測(cè)試劑盒
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