產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 產(chǎn)品名稱:禽白血病病毒PCR檢測試劑盒說明書 規(guī)格:50T 編號(hào):HE31969-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。 ? 儲(chǔ)需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點(diǎn): 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對(duì)照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 正己烷中2,4,4’-三氯聯(lián)溶液(PCB 28) 1.2ml Actinomyces israelii衣氏放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒 正己烷中2,2’,5,5’-四氯聯(lián)溶液(PCB 52) 1.2ml Actinomyces naeslundii內(nèi)氏放線菌PCR試劑盒 正己烷中2,3',4,4',5-五氯聯(lián)溶液(PCB 118) 1.2ml Actinomyces naeslundii內(nèi)氏放線菌染料法熒光定量PCR試劑盒 正己烷中2,2',4,4',5,5'-六氯聯(lián)溶液(PCB 153) 1.2ml Actinomyces naeslundii內(nèi)氏放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒 正己烷中2,2',3,4,4',5,5'-七氯聯(lián)溶液(PCB 180) 1.2ml Actinomyces pyogenes化膿放線菌PCR試劑盒 正己烷中2,2',3,3',4,4',5,5'-八氯聯(lián)溶液(PCB 1 1.2ml Actinomyces pyogenes化膿放線菌染料法熒光定量PCR試劑盒 正己烷中2,2',3,3',4,5,5',6,6'-九氯聯(lián)溶液(PCB 1.2ml Actinomyces pyogenes化膿放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒 正己烷中3,4,4',5-四氯聯(lián)溶液(PCB81) 1.2ml Actinomyces spp.放線菌屬通用PCR試劑盒 正己烷中3,3',4,4'-四氯聯(lián)溶液(PCB77) 1.2ml Actinomyces spp.放線菌屬通用染料法熒光定量PCR試劑盒 正己烷中溴菊酯溶液 1.2ml Actinomyces spp.放線菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒 甲醇中阿特拉津溶液 1.2ml Adeno-associad Virus(AAV)腺伴隨病毒PCR試劑盒 甲醇中五氯溶液 1.2ml Adeno-associad Virus(AAV)腺伴隨病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 甲醇中環(huán)氧七氯B溶液 1.2ml Adeno-associad Virus(AAV)腺伴隨病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 正己烷中環(huán)氧七氯B溶液 1.2ml Adenovirus(AV)腺病毒A型PCR試劑盒 正己烷中環(huán)氧七氯A溶液 1.2ml Adenovirus(AV)腺病毒A型染料法熒光定量PCR試劑盒 50bp DNA Ladder/DL50片段:50,100,150,200,250,300,400,500bp50次/300ul/支,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,保存:-20℃ 中文名稱: 50bp DNA Ladder 其他名稱: DL50 產(chǎn)品規(guī)格: 50~500 包裝: 50次/300ul/支 級(jí)別:即用型 規(guī)格:50次/300ul/支 分子量范圍:50~500 參考片段:50、100、150、200、250、300、400、500 使用方法:直接上樣電泳 效果:每條帶的量為75ng 性狀:液體 用途:生化研究。用于凝膠電泳中雙鏈線狀DNA分子量大小的參照 保存:2~8°C保存,長期請(qǐng)存放于-20°C 禽白血病病毒PCR檢測試劑盒說明書生長停滯特異性蛋白6抗體Zeylenone別名: 分子式: C21H18O7性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫 谷胱甘肽合成酶抗體1,6,2',3',6'-O-Pentaacetyl-3-O-trans-p-coumaroylsucrose別名: 分子式: C31H38O18性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫 血型糖蛋白δ抗體(6E,12E)-tradeca-6,12-diene-8,10-diyne-1,3-diol diaceta別名: 分子式: C18H22O4性狀: Oil純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫 糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)亮氨拉鏈蛋白抗體1,5-Anhydroglucitol別名: 分子式: C6H12O5性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫 γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶6抗體Zeylenol別名: 分子式: C21H20O7性狀: Powder純度: 97.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫 G氨基丁受體δ/GABAA Rδ抗體Methyl (9Z,11E)-13-hydroxyoctadeca-9,11-dienoa別名: 分子式: C19H34O3性狀: Oil純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫 G氨基丁受體γ1/GABAA Rγ1抗體3-O-(6'-O-Galloyl)-β-D-glucopyranosylmaltol別名: 分子式: C19H20O12性狀: Powder純度: 97.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫 磷化γ氨基丁γ2受體抗體Mumeose K別名: 分子式: C25H32O15性狀: Powder純度: 93.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 |