特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

熒光染料的優(yōu)點：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設(shè)計和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決?？偟膩碚f，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實驗手段。
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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團，3'端標(biāo)記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時，引物與該探針同時結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴增延伸到探針結(jié)合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點：
成本高；
設(shè)計難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術(shù)的定量原理：
擴增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應(yīng)擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應(yīng)的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
檸檬酸一水Calreticulin (D3E6) XP® Rabbit mAb二氨

SalubrinalCalreticulin (D3E6) XP® Rabbit mAb溴甲基-甲酸

酸伯安喹；酸伯氨喹IL-2 (D7A5) Rabbit mAb2-氨基-甲

D-熒光素,蟲熒光素SignalSilence® SirT1 siRNA IN,N-二甲基酰

麻保沙星;馬波沙星IL-1β (3A6) Mouse mAb硝基吡唑

MK0677，伊布莫侖甲磺酸鹽Drebrin A Antibody2,二氟甲

瓊脂粉Di-Methyl-Histone H3 (Lys27) (D18C8) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)溶劑橙 2

三氟胸苷;三氟尿苷(TFT) TPX2 (D2R5C) XP® Rabbit mAb4,4'-二氟甲哌

四水合輔羧酶;四水合硫焦酸酯Skp1 (D3J4N) Rabbit mAb間二氟甲氧基溴

甲磺酸加替沙星Phospho-M-CSF Receptor (Tyr699) (D10B11) Rabbit mAb6-溴-2-吡啶甲酸甲酯

鹽酸哌羅匹隆CPT1A (D3B3) Rabbit mAb2-溴-5-甲基三氟甲

替拉扎明Plectin-1 (D6A11) Rabbit mAb2-甲基-(三氟甲基)芐基溴

糊精;白糊精Lamin B2 (D8P3U) Rabbit mAb溴代芐鹽酸鹽

鹽酸芐達明SignalSilence® c-Raf siRNA I氯-2-氟酚

葡聚糖凝膠G-50;交聯(lián)葡聚糖G-50(中顆粒)E2A (D2B1) Rabbit mAb三基亞正基乙酸甲酯

葡聚糖凝膠G-50;交聯(lián)葡聚糖G-50(粗顆粒)TAP2 Antibody2-溴乙基乙基

L-(+)-扁桃酸;S-扁桃酸Bcl-xL Blocking Peptide6-溴-1,并惡烷

D-(-)-扁桃酸;R-扁桃酸β-Actin (8H10D10) Mouse mAb (HRP Conjuga)2-氨基-4,5-二氟甲酸
巴氏阿米巴原蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒兔白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒DAPK3  凋亡相關(guān)蛋白激酶3抗體100 ul

兔白蛋白(Albumin)ELISA試劑盒Delx-1  DTX1抗體300 ul

兔阿霉素(ADR)ELISA試劑盒envelope glycoproin (Dengue virus type-2)  登革熱病毒抗體400 ul

兔γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶1(GGT1)ELISA試劑盒polyproin (DHAV)  鴨甲型肝炎A病毒抗體100 ul

兔β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒Desmin  結(jié)蛋白抗體100 ul

兔β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒DIO2  脫酶2抗體100 ul

兔S100-A5蛋白(S100A5)ELISA試劑盒DISC1 (CT)  DISC1 C端抗體100 ul

兔P物質(zhì)受體(SP-R)ELISA試劑盒DISC1(NT)  DISC1 N端抗體1 Kit

兔p物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒DLK1  穿膜蛋白DLK1抗體100 ul