PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決?？偟膩碚f，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。

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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號階段，擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
十二(標(biāo)準(zhǔn)品)HSL (D6W5S) XP® Rabbit mAb二甲酰硫素

二乙（DEA）(標(biāo)準(zhǔn)品)Liprin β1 AntibodyN-甲?；?2-氯-5-三氟

2,二硝基氯標(biāo)準(zhǔn)溶液(1.00mg/ml,基體：甲)Ghost Dye™ Red 780 Viability DyeMETHOXY-2-(TRIFLUOROMETHYL)PHENYLBORONIC ACID, PINACOL ESR

標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,溶劑：甲)TRAF4 (D1N3A) Rabbit mAb反式-基-1-基-酸

2,二氯甲(標(biāo)準(zhǔn)品)Syntaxin 1A (D4E2W) Rabbit mAb2-[(乙酰硫)甲基]-基酸

2,5-二氯甲(標(biāo)準(zhǔn)品)Flotillin-1 (D2V7J) XP® Rabbit mAb(R)-(-)-alpha-甲氧基

3,二氯(標(biāo)準(zhǔn)品)Flotillin-1 (D2V7J) XP® Rabbit mAb2,5-二氟磺酰

3,二氯聯(lián)(標(biāo)準(zhǔn)品)Vinculin (E1E9V) XP® Rabbit mAb (HRP Conjuga)羥基-2-萘甲酸甲酯

直接藍(lán)6(標(biāo)準(zhǔn)品)ALDH2 AntibodyFLUORO-5-METHOXYBIPHENYL-CARBOXYLIC ACID

分散橙37(標(biāo)準(zhǔn)品)Smac/Diablo (D5S3R) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)6-氯-5-甲基吡啶-酸

鄰二甲酸二酯(標(biāo)準(zhǔn)品)MAVS (D5A9E) Rabbit mAb (PE Conjuga)1-溴-2-甲基萘

二甲基二氯化錫(標(biāo)準(zhǔn)品)ULK1 (D8H5) Rabbit mAb (Biotinylad)(2-溴-氧基)四氫-2H-吡喃

二乙基錫(標(biāo)準(zhǔn)品)VISTA (D1L2G™) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)硒脲

甲基內(nèi)吸(標(biāo)準(zhǔn)品)T2 (D6B9Y) Rabbit mAb6-(CYCLOPROPYLAMINO)-5-NITROQUINOLINE

2,4'-滴滴涕(標(biāo)準(zhǔn)品)PKM1 (D30G6) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)5-甲氧基黃酮

2,4′-DDT標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/mL,基體：異辛烷)PSD93 (D4Z4D) Rabbit mAb(氟-甲氧基基)三氟酸

4,4'-滴滴涕(標(biāo)準(zhǔn)品)DMAP1 (D4O2G) Rabbit mAb(R)-(+)-2-氯酸甲酯

溴菊酯(標(biāo)準(zhǔn)品)SimpleChIP® Human DMD Intron 2 Primers2-吡啶乙酸甲酯
犬腺體病毒2型探針法熒光PCR檢測試劑盒白介素5受體alpha(IL5RA)ELISA試劑盒Phospho-IRAK1 (Thr387)  酸化白介素-1受體相關(guān)激酶1抗體100 ul

白介素5(IL-5)ELISA試劑盒IRF3  干擾素調(diào)節(jié)因子3100 ul

白介素4受體(IL4R/CD124)ELISA試劑盒Phospho-IRF3 (Ser396)  酸化干擾素調(diào)節(jié)因子3100 ul

白介素4(IL-4)ELISA試劑盒IRAK4  白介素-1受體相關(guān)激酶4抗體100 ul

白介素37(IL-37)ELISA試劑盒IL-1RA  白介素-1受體拮抗劑抗體100 ul

白介素35(IL-35)ELISA試劑盒IL-1R1  白介素1受體1抗體100 ul

白介素33(IL-33)ELISA試劑盒IL-1R II  白介素1受體Ⅱ抗體100 ul

白介素32(IL-32)ELISA試劑盒IRF4  干擾素調(diào)節(jié)因子4抗體100 ul

白介素31(IL-31)ELISA試劑盒ILT2/CD85j  細(xì)胞表面免疫球蛋白樣轉(zhuǎn)錄因子2抗體100 ul