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新生隱球菌PCR檢測試劑盒說明書

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更新日期:
2024-08-28
點擊次數(shù):
923
產(chǎn)品特點:
新生隱球菌PCR檢測試劑盒說明書實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
  50T新生隱球菌PCR檢測試劑盒說明書的詳細(xì)資料:

服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱

新生隱球菌PCR檢測試劑盒說明書

 英文名稱

 Cryptococcus neoformansPCR

 貨號

 HE30865-R

實驗外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動物模型構(gòu)建

?
特點優(yōu)勢:
    1.   特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
    2.   重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
    3.   靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
    4.   實用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
     5.   優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
    6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
Fmoc-L-羥脯氨酸/N-芴甲氧羰基-L-羥脯氨酸/FMOC-L-4-羥基脯氨酸/N-FMOC-順式-4-羥基-D-脯氨酸/(2S,4R)-1-芴甲氧羰基-4-羥基吡咯烷-2-羧酸/Fmoc-Hyp-OH 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;500mg

FMOC-L-蘇氨酸/N-芴甲氧羰基-L-蘇氨酸/N-(9-芴甲氧羰基)-L-蘇氨酸/Fmoc-Thr-OH 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g

FMOC-L-色氨酸/N-芴甲氧羰基-L-色氨酸/N-(9-芴甲氧羰基)-L-色氨酸/Fmoc-Trp-OH 質(zhì)量規(guī)格:95%,標(biāo)準(zhǔn)品,大豆來源 包裝;25g

FMOC-D-色氨酸/N-芴甲氧羰基-D-色氨酸/N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-D-色氨酸/Fmoc-D-Trp-OH 質(zhì)量規(guī)格:>90 %,GC 包裝;5g

FMOC-D-纈氨酸/芴甲氧羰基-D-纈氨酸/Fmoc-D-Val-OH 質(zhì)量規(guī)格:>90%,GC 包裝;100mg

對氯苯甘氨酸/DL-對氯苯甘氨酸/DL-2-(4-)甘氨酸/DL-α-氨基-4-氯-/PCPG 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;25mg

DL-鄰氯苯甘氨酸/DL-2-氯苯甘氨酸/DL-鄰氯-α-氨基/混旋鄰氯苯甘氨酸/DL-2-(2-Chlorophenyl)glycine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g

L-鄰氯苯甘氨酸/(S)-2-氯苯甘氨酸/L-(+)-鄰氯苯甘氨酸/S-(+)-鄰氯苯甘氨酸/L(-)-鄰氯苯甘氨酸/右旋鄰氯苯甘氨酸/L-(+)-2-甘氨酸/(S)-α-氨基-(2-)乙酸/L-(+)-2-Chlorophenylglycine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g

氯甲酸芐酯/氯甲酸苯甲基酯/苯甲氧基/苯甲氧羰酰氯/芐基/芐酯基氯/甲酸氯芐酯/苯甲氧基甲酰氯/芐氧羰酰氯/CBZ-CL 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g

N-苯甲酰-L-纈氨酰甘氨酰-L-精氨酸對硝基鹽酸鹽/N-BZ-Val-Gly-Arg PNA•HC1 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g

D-纈氨酰-L-白氨酰-L-賴氨酸對硝基/D-纈氨酰-L-亮氨酰-L-賴氨酰對硝基/D-Val-Leu-Lys PNA•2HC1 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g

Z-甘氨酰-L-脯氨酰-L-精氨酰對硝基醋酸鹽/Z-甘氨酰-L-脯氨酰-L-精氨酰對硝基乙酸鹽/Z-Gly-Pro-Arg PNA acetate salt 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g

肌氨酸鈉/N-甲基氨基乙酸鈉/N-甲基甘氨酸單鈉鹽/N-甲基甘氨酸鈉/sodium Sarcosine 質(zhì)量規(guī)格:AR,>98% 包裝;5g

L-天門冬氨酸鈣/L-天冬氨酸鈣/生力鈣/L-Aspartic acid calcium salt 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;250mg

L-谷氨酸-5-甲酯/L-谷氨酸γ-甲酯/L-γ-谷氨酸甲酯/L-2-氨基戊二酸-5-甲酯/L-Glutamic acid 5-methyl ester 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g

N-芐基甘氨酸乙酯/N-Benzylglycine ethyl ester 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g

L-叔亮氨酸/L-2-氨基-3,3-二甲基丁酸/L-tert-Leucine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g
新生隱球菌PCR檢測試劑盒說明書Armillariella│mellea 中文名稱:密環(huán)菌種屬:Armillariella│mellea提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25℃ 純度:98%

Thermoanaerobacter│siderophilus 中文名稱:嗜金屬熱厭氧桿菌(00開頭的農(nóng)業(yè)均無法提供)種屬:Thermoanaerobacter│siderophilus分離基物:油田采出提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)甲烷培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:482生長條件:65℃存儲條件:定期移植法 純度:98%

Paenibacillus│peoriae 中文名稱:皮爾瑞俄類芽孢桿菌種屬:Paenibacillus│peoriae分離基物:土壤樣品提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長條件:20℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:98%

Paenibacillus│pabuli 中文名稱:飼料類芽胞桿菌種屬:Paenibacillus│pabuli分離基物:石油污染土提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:纖維素降解菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;定期移植法 純度:99%

Virgibacillus│picturae 中文名稱:壁畫枝芽胞桿菌種屬:Virgibacillus│picturae分離基物:土壤樣品提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長條件:20-30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:99%

Rhodococcus│gordoniae 中文名稱:戈氏紅球菌種屬:Rhodococcus│gordoniae分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:在無機(jī)鹽培養(yǎng)基:中以100mg/L的苯酚為碳源培養(yǎng),24h內(nèi)對100mg/L的苯酚降解率99%培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:28℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;定期移植法 純度:99%

Sphingosinicella│microcystinivorans 中文名稱:食微囊藻素鞘氨醇胞菌種屬:Sphingosinicella│microcystinivorans分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:在無機(jī)鹽培養(yǎng)基:中添加1%LB情況下,3d對20ppm降解率46.5%;對100p和降解率20-25%,降解過程中有紅色中間代謝產(chǎn)物產(chǎn)生。適生長溫度為28℃。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:28℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;定期移植法 純度:≥99%

Myroides│sp. 中文名稱:香味菌種屬:Myroides│sp.分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:在無機(jī)鹽培養(yǎng)基:中添加100mg/L的N-甲基,降解率達(dá)31%。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;定期移植法 純度:98%

 

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 新生隱球菌 PCR檢測試劑盒 50T
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