產(chǎn)品僅用于科研注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品名稱：長雙歧桿菌PCR檢測試劑盒說明書
英文名稱：Bifidobacterium longumPCR
編號：HE30697-R
類別:PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
?
儲需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
特點(diǎn)：
1.即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單，定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化，特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照，便于分析試驗(yàn)結(jié)果。
保存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
哈爾滿生物堿標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 HARMANE ALKALOIDS STANDARDS KIT(RG) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 包裝;5g

生姜標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 GINGER STANDARDS KIT(P) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 包裝;10g

生姜標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 GINGER STANDARDS KIT(P) 質(zhì)量規(guī)格：>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g

大蒜臭氣標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 GARLIC STENCH STANDARDS KIT(SG) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 包裝;1g

大蒜標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 GARLIC STANDARDS KIT(SH) 質(zhì)量規(guī)格：BS 包裝;25g

紅景天標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 GOLDENROOT (RHODIOLA ROSEA) STANDARDS KIT(P) 質(zhì)量規(guī)格：>97%(HPLC),BC 包裝;5g

紅景天標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 GOLDENROOT (RHODIOLA ROSEA) STANDARDS KIT(P) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 包裝;25g

北美黃蓮標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 GOLDENSEAL STANDARDS KIT(P) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 包裝;5g

沒藥甾酮標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 GUGGULSTERONES STANDARDS KIT(P) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC 包裝;100ml

沒藥甾酮標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 GUGGULSTERONES STANDARDS KIT(P) 質(zhì)量規(guī)格：BC 包裝;25ml

積雪草標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 GOTU KOLA STANDARDS KIT(P) 質(zhì)量規(guī)格：BC 包裝;1g

積雪草標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 GOTU KOLA STANDARDS KIT(P) 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 包裝;25g

GOLDTHREAD(COPTIS) STANDARDS KIT(P) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 包裝;5g

葡萄多酚標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 GRAPE POLYPHENOLICS(STILBENES) STANDARDS KIT(P) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 包裝;250mg

葡萄多酚標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 GRAPE POLYPHENOLICS(STILBENES) STANDARDS KIT(P) 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 包裝;1g

葡萄糖胺標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 GLUCOSAMINE STANDARDS KIT(RG) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 包裝;250mg

刺五加苷標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒# 2 ELEUTHEROSIDE STANDARDS KIT #2(P) 質(zhì)量規(guī)格：BR 包裝;25g
長雙歧桿菌PCR檢測試劑盒說明書Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus 中文名稱：德氏乳桿菌保加利亞亞種種屬:Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus提供形式:凍干管；1mL菌液；安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:酸奶培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:MRS培養(yǎng)基:：酪胨 10.0g，牛肉粉 8.0g，酵母粉 4.0 g，葡萄糖 20.0 g，硫酸鎂 0.2 g，乙酸鈉 5.0 g，檸檬酸三銨 2.0 g，磷酸氫二鉀 2.0 g，硫酸錳 0.05 g，吐溫80 1.0 g，蒸餾 1000mL。pH6.2±0.2。傳代方法①凍干管：75%酒精擦拭管壁，后用砂輪在凍干管壁劃兩圈，掰斷，用200μL無菌或培養(yǎng)基:充分溶解，平板涂布，活化培養(yǎng)。 ②斜面：試管口用75%酒精擦拭后，火焰灼燒，后用無菌接種鏟切塊，挑取接入平板或斜面，培養(yǎng)。生長條件:37℃，厭氧。生長特性G+，菌體長桿狀，兩端鈍圓，鏈狀排列，無芽胞，有異染粒。菌落圓形，表面粗糙，突起，邊緣整齊，淺黃色，不透明。發(fā)酵葡萄糖、果糖，不發(fā)酵木糖、蔗糖、阿拉伯糖。從葡萄糖酸鹽產(chǎn)酸，接觸酶陰性，牛奶反應(yīng)產(chǎn)酸、酸凝，兼性厭氧。15℃不生長，45℃生長。產(chǎn)乳酸。存儲條件:2-8℃冷藏 純度：99%

Acetobacter sp. 中文名稱：醋酸菌種屬:Acetobacter sp.提供形式:凍干管，斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:氧化乙醇產(chǎn)醋酸培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:醋酸菌培養(yǎng)基:：Glucose (葡萄糖) 100g Yeasst extract (酵母膏) 10g CaCO3 20g Agar (瓊脂) 15g Distilled water (蒸餾) 1000ml Adjust (調(diào)) pH to 6.8傳代方法①凍干管：75%酒精擦拭管壁，后用砂輪在凍干管壁劃兩圈，掰斷，用200μL無菌或培養(yǎng)基:充分溶解，平板涂布，活化培養(yǎng)。 ②斜面：試管口用75%酒精擦拭后，火焰灼燒，后用無菌接種鏟切塊，挑取接入平板或斜面，培養(yǎng)。生長條件:30℃，好氧存儲條件:2-8℃冷藏 純度：99%

Agrobacteriumrhizogenes(Rikeretal.)Conn 中文名稱：發(fā)根土壤桿菌（發(fā)根植物單胞菌）種屬:Agrobacteriumrhizogenes(Rikeretal.)Conn安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:9生長條件:25-28℃ 純度：≥98%

Lactobacillus plantarum 中文名稱：植物乳桿菌種屬:Lactobacillus plantarum提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究；分析檢測。檢測煙酸、泛酸、生物素。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:MRS培養(yǎng)基:：酪胨 10.0g，牛肉粉 8.0g，酵母粉 4.0 g，葡萄糖 20.0 g，硫酸鎂 0.2 g，乙酸鈉 5.0 g，檸檬酸三銨 2.0 g，磷酸氫二鉀 2.0 g，硫酸錳 0.05 g，吐溫80 1.0 g，蒸餾 1000mL。pH6.2±0.2。生長條件:37℃，微好氧存儲條件:2-8℃ 純度：97%

Alcaligenes│faecalis 中文名稱：蔥頭伯克氏菌種屬:Alcaligenes│faecalis提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:化妝品抗菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0002生長條件:28℃存儲條件:真空冷凍干燥法；定期移植法 純度：97%

IymomonasmobilisKluyverandVanNiel 中文名稱：運(yùn)動發(fā)酵單孢菌種屬:IymomonasmobilisKluyverandVanNiel安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)灑精培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:53生長條件:30℃半?yún)捬跖囵B(yǎng) 純度：97%

Micrococcus│lysodeikticus 中文名稱：溶壁微球菌種屬:Micrococcus│lysodeikticus提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:溶菌試驗(yàn)培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0002生長條件:28℃存儲條件:真空冷凍干燥法；定期移植法 純度：96%

Streptococcus│faecalis 中文名稱：糞鏈球菌種屬:Streptococcus│faecalis提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:用于測定各類氨基酸。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0500生長條件:28℃存儲條件:真空冷凍干燥法；定期移植法 純度：96%
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
技術(shù)原理：
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）
產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。